
| 品牌 | 其他品牌 | 適用領域 | 科研 |
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| 產地 | 進口 | 加工定製 | 是 |
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Newcomer Supply Funus, Grocott Methenamine Silver (GMS) Stain Kit 程序,包括微波修改,是展示多種真菌生物體(ti) 的最佳染色方法之一,包括:肺孢子菌屬、曲黴屬、芽生菌屬、念珠菌屬和組織胞漿菌屬。
固定: 10% 福爾馬林,磷酸鹽緩衝(chong) 液(第 1090 部分)
技術: 石蠟切片切成 4 微米。
解決(jue) 方案: 所有解決(jue) 方案均由 Newcomer Supply, Inc. 製造。
所有 Newcomer Supply Stain Kits 均設計為(wei) 與(yu) 按照下麵提供的染色程序填充至 40 ml 的Coplin 罐一起使用。套件中的某些溶液可能包含額外的體(ti) 積。
如有必要,在烤箱中加熱幹燥的組織切片/載玻片。
所有玻璃器皿/塑料器皿在使用前必須進行酸洗。
請參閱程序注釋 #1 和 #2。
準備 Silver-Methenamine 工作溶液並充分混合。
溶液 C:xiaosuanyin 20 毫升
溶液 D:硼酸甲胺 20 ml
使用前約 20 至 30 分鍾,在水浴中將銀-甲胺工作溶液預熱至 45°C-60°C。
請參見程序說明 #3。
如果使用微波改性,請勿預熱;步驟 11。
用二甲苯更換三次,每次 3 分鍾,*脫蠟切片。通過 100% 和 95% 乙醇各兩(liang) 次更換水合物,每次 10 次。用蒸餾水洗幹淨。
請參閱程序注釋 #4 和 #5。
在溶液 A 中氧化:5% 鉻酸,水溶液 1 小時。
微波改性:見程序注釋#6
在裝有溶液 A:5% 鉻酸水溶液的塑料Coplin 罐中氧化載玻片, 並在 60°C 下微波 1 分 20 秒。
用自來水衝(chong) 洗幹淨;用蒸餾水衝(chong) 洗。
放入溶液 B:1% 亞(ya) 硫酸氫鈉水溶液中 1 分鍾。
用自來水衝(chong) 洗 5 分鍾;用蒸餾水衝(chong) 洗幹淨。
在 45°C-60°C 或室溫下,將載玻片在預熱的 Silver-Methenamine 工作溶液(步驟 #4)中孵育 12-18 分鍾,直到切片呈現紙袋棕色。
定期取出對照品,用溫蒸餾水衝(chong) 洗,用顯微鏡檢查是否有足夠的銀浸漬。真菌應該是深棕色的。
如果生物體(ti) 的顏色不夠深,請將載玻片放回溫銀溶液中。每隔 2-3 分鍾重新檢查一次,直到達到所需的強度。
與(yu) 其他真菌相比,肺孢子蟲的染色時間可能更長。
在室溫下染色需要更長的孵育時間。
微波改性:
將載玻片放入裝有 Silver-Methenamine 工作溶液和微波的塑料Coplin 罐中,在 70°C 下孵育 1 分鍾。
用顯微鏡檢查是否有足夠的發育。
如果需要額外孵育,請將載玻片放回溫銀溶液中。每隔 2-3 分鍾重新檢查一次。
用三到四次蒸餾水衝(chong) 洗。
在這一步切勿使用自來水。
溶液 E 中的色調:氯化金 0.1%,水溶液直至切片變灰;20秒到1分鍾。
用蒸餾水衝(chong) 洗幹淨。
去除溶液 F 中的未還原銀:2% liudailiusuanna,水溶液 2 分鍾。
用自來水衝(chong) 洗 5 分鍾;用蒸餾水衝(chong) 洗。
溶液 G 中的複染劑:Light Green SF Yellowish Stain 0.2%,水溶液 2 分鍾。
在 95% 和 100% 乙醇中的兩(liang) 次更換中快速脫水。二甲苯三換清,每浸10次;蓋玻片與(yu) 兼容的封固劑。
菌類 | 清晰的黑色細胞壁,內(nei) 部結構清晰可見 |
背景 | 綠色的 |
粘蛋白 | 灰褐色至深灰色 |
酸洗所有玻璃器皿/塑料器皿(第 12086 部分)並用蒸餾水多次更換*衝(chong) 洗。
塑料(第 5500 部分)、塑料尖頭或塗有石蠟的金屬鉗必須與(yu) 任何銀溶液一起使用,以防止銀鹽沉澱。任何種類的金屬都不應與(yu) 任何銀溶液接觸。隻能使用玻璃溫度計。
在較高溫度下染色意味著更快的顯影,但可能會(hui) 導致在工作銀溶液中形成沉澱物並沉積在載玻片上。將銀溶液保持在 45°C-60°C 之間會(hui) 減少沉澱。
在每個(ge) 步驟後排空載玻片以防止溶液殘留。
在手術過程中的任何時候都不要讓切片變幹。
建議的微波程序已在 Newcomer Supply 進行了測試。此程序是一個(ge) 指南,應開發用於(yu) 您的實驗室的技術。
如果使用二甲苯替代品,請嚴(yan) 格遵循製造商關(guan) 於(yu) 脫蠟和清除步驟的建議。
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